弧菌顯色培養(yǎng)基使用說明書

　　(Chromogenic Vibrio Agar)

　　【包裝規(guī)格】

　　環(huán)凱貨號 CRM008(干粉);CP0570(即用型平板)

　　包裝形式 71.3g/瓶;20套(φ9cm) /盒

　　【產(chǎn)品用途】

　　弧菌顯色培養(yǎng)基用于水產(chǎn)品及食物中毒樣品中弧菌特別是副溶血性弧菌的分離和鑒定。

　　【檢驗原理】

　　蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發(fā)酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非弧菌細菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;混合色素與副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌所對應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團，在淡黃色平板上產(chǎn)生品紅色菌落(副溶血性弧菌)和綠-藍綠色的菌落(霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌)。

　　【配方成分】

　　弧菌顯色培養(yǎng)基配方(每升) 含量：

　　蛋白胨 18.8g

　　酵母膏粉 5.0g

　　氯化鈉 10.0g

　　蔗糖 20.0g

　　抑菌劑 1.5g

　　瓊脂 13.0g

　　混合色素 3.0g

　　最終pH 9.0±0.2

　　【使用方法】

　　1、取瓶內(nèi)弧菌顯色培養(yǎng)基干粉71.3克，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至完全溶解，不需高壓滅菌，冷至約50℃，傾注滅菌平皿。

　　2、以無菌操作取檢樣25 g(mL)，加入3%氯化鈉堿性蛋白胨水225 mL，用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8 000 r/min均質(zhì)1 min，或拍擊式均質(zhì)器拍擊2 min，或用Pulsifier脈沖式樣品處理器均質(zhì)30秒，制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質(zhì)器，則將樣品放入無菌乳缽中磨碎，然后放在500 mL的滅菌容器內(nèi)，加225 mL3%氯化鈉堿性蛋白胨水，并充分振蕩。

　　3、增菌：將上述1:10稀釋液于36 ±1 ℃培養(yǎng)8～18h。

　　4、分離：在增菌液中用接種環(huán)取一環(huán)，于弧菌顯色平板上劃線分離，于36 ±1 ℃培養(yǎng)18～24 h。

　　5、通過驗證試驗進一步確認假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革蘭氏染色、生化鑒定等。進一步的試驗。

　　注：如產(chǎn)品類型為干粉，按上述1-5進行操作;若為即用型平板，按2-5進行操作即可。

　　【質(zhì)量控制】

　　【儲存條件及保質(zhì)期】

　　即用型平板： 2~8℃，避光保存，貯存期三個月。

　　脫水干粉培養(yǎng)基：旋緊瓶蓋，2~8℃密封干燥保存，貯存期二年。

　　【注意事項】

　　1. 稱量時注意粉塵，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。

　　2. 干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋，避免吸潮結(jié)塊。

　　3. 自制平板時需注意培養(yǎng)基的厚度，厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降，開裂;因此，一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養(yǎng)基，平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。

　　4. 即用型成品平板應(yīng)該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產(chǎn)品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水，屬于正?，F(xiàn)象。使用前應(yīng)平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預(yù)干燥。

　　5. 質(zhì)檢報告可以登錄環(huán)凱網(wǎng)站http://www.huankai.com， 打開“客服中心”頁面，輸入產(chǎn)品批號下載。

　　【廢物處理】

　　檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。

　　【執(zhí)行標準】

　　Q/HKSJ 03-2011 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司企業(yè)標準 普通微生物培養(yǎng)基

　　【說明版本】

　　2013年1月14日

　　【參考文獻】

　　1.GB/T4789.7-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 副溶血性弧菌檢驗

　　2.SN0173-2010 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 出口食品中副溶血性弧菌檢驗

　　3.SN1022-2010中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準 出口食品中霍亂弧菌檢驗