格羅貝爾舉辦深圳先進院神經(jīng)元成像小鼠手術(shù)培訓(xùn)
[db:作者] - 2020-08-24
應(yīng)中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院腦認知與腦疾病研究所（以下簡稱“深圳先進院”）邀請，格羅貝爾生物科技公司Global Biotech Inc,為深圳先進院圓滿舉辦了一場由
格羅貝爾引進中國并始終為中國代理的inscopix nVoke2.0在體自由動物神經(jīng)元成像應(yīng)用的技術(shù)培訓(xùn)。
當日，深圳先進院20余名科研人員參加了這次inscopix nVoke2.0的小鼠手術(shù)培訓(xùn)。格羅貝爾生物科技公司技術(shù)人員帶領(lǐng)大家一道順利完成手術(shù)全過程。
我們對手術(shù)過程做以下記錄，供神經(jīng)科研人員參考：
- 實驗前準備好所有的手術(shù)器械。
- 小鼠麻醉后，將小鼠的頭部固定在腦定位儀上，打開頭頂皮膚，將頭骨上面清理干凈，露出清晰骨縫，找到Bregma，Lambda點，將前后水平調(diào)好后，在Lambda和Bregma連線的中間位置，往左右兩邊取相同距離，進行左右水平的調(diào)整。
- 根據(jù)算出來的目標組織位點，在目標位置在頭骨上的投影點處鉆一小孔，將準備好的病毒液體注射入目標位點，創(chuàng)口消毒消炎處理，縫合皮膚。
- 2~4周以后，在之前打病毒的位置，用同樣方法定位出目標位點。
- 根據(jù)打算植入的透鏡粗細判斷要鉆孔的大小，骨孔直徑比透鏡直徑粗0.3~0.4mm即可，在目標點位四周相應(yīng)位置處標出鉆孔邊緣位置，用電鉆鉆骨孔。一般要觀察的目標位點要比透鏡底端低約200微米即可，如果要觀察的是較淺皮層位置，可以直接埋植透鏡，如果要觀察的是較深的腦區(qū)，則需要將埋植位點以上300~400微米以外的柱形腦組織區(qū)域全部除去。
- 可以用相應(yīng)粗細的平頭注射針頭連接上真空泵，用適宜壓力吸除組織，吸除過程中不斷在腦組織上方灌注生理鹽水進行抽吸以去除血液，吸到目標位置上方約300~400微米即可，孔洞直徑參考要埋植的透鏡粗細，直到血液不再流出可停止灌流。
- 在距離鉆孔約5mm處鉆2~3個淺孔，擰入2~3枚骨螺絲釘。
- 將透鏡與微型顯微鏡連接到夾持桿，并固定在定位儀上。
- 打開數(shù)據(jù)采集軟件，打開顯微鏡激發(fā)光，實時觀察畫面，將透鏡慢慢深入動物腦內(nèi)，關(guān)閉小鼠周圍的強光，此時采集軟件上大部分為黑色，待透鏡接近目標病毒表達位置時，病毒的綠色熒光會使得畫面較明顯的變亮，根據(jù)畫面中模糊能看出血管的影像或采集軟件中光強的histogram峰值在7000左右，可以在此位置埋植透鏡。
- 用牙科水泥將骨螺釘和透鏡上的黑色膠圈粘合在小鼠頭骨上。
- 待牙科水泥完全干燥堅硬后，將透鏡夾持器小心取下。用黃藍遮蓋硅膠混合為完全綠色，涂在透鏡上端。
- 待小鼠恢復(fù)，需單籠飼養(yǎng)，防止被啃咬透鏡。
多年來，格羅貝爾生物科技公司Global Biotech Inc,與深圳先進院保持良好的技術(shù)交流和合作，并每年作為金牌贊助商參加深圳先進院舉辦的各類腦科學(xué)會議和培訓(xùn)班，為中國腦科學(xué)發(fā)展做出力所能及的貢獻。
特別聲明：
近期，有公司和個體不斷擾亂Inscopix中國市場，希望中國科研人員向Inscopix一進入中國市場就選擇并始終為中國代理----格羅貝爾生物科技公司（美國Global Bietech Inc,）詳細咨詢、核實，辨別其他推銷公司的規(guī)模、特別是技術(shù)團隊能力，以免受損。
